液相色谱柱保留时间变化的原因
2021-04-20 10:23:31来源：admin
液相色谱柱保留时间不重现可能由多种因素引起，通常还会影响到峰面积的重现性，建议检查以下几个方面：
1、确认流动相是新鲜配制的，比例没有错误。比如一些挥发性的溶液，如乙酸，最好及时更换。
2、确认液相色谱条件在色谱柱使用范围之内，如 pH 范围、温度、压力。
3、仔细观察柱前压的变化，如果压力稳定，就可以判断泵的系统没有问题；如果是压力不稳定，一定会影响保留时间，这种状况通常是由于泵头里有气泡造成的。请将流动相仔细脱气，并排出泵内气泡。
4、观察色谱峰形、柱效变化情况，确认色谱柱是否被污染，如果确定色谱柱污染，可尝试使用适当溶剂冲洗。
5、如果同时伴有色谱柱柱压升高，解决方法请参见“液相色谱柱柱压升高”部份。
6、如果使用梯度洗脱方法，请确认平衡时间足够长。流动相中使用离子对试剂（烷基磺酸钠等）或固定相为正相硅胶等，往往需要更长的平衡时间。
7、确认样品是否过载，减少进样量（进原进样量的 10%确认）。
8、组分在液相色谱柱中保留不够。调整色谱条件，使样品在柱上适当保留。
