选择液相色谱仪流动相,你需要注意这些方面
2019-01-21 22:19:08来源:admin
在化学键合相色谱法中,溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相液相色谱中,溶剂的强度随极性的增强而增加;正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。
反相液相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性调整剂的性质及其所占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。一般情况下,甲醇-水系统已能满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小、价格低,是反相色谱最常用的流动相。但Snyder则推荐采用乙腈-水系统做初始实验,因为与甲醇相比,乙腈的溶剂强度较高且粘度较小,并可满足在液相色谱仪紫外205nm处检测的要求,因此,综合来看,乙腈-水系统要优于甲醇-水系统,但价格较贵。
在分离含极性差别较大的多组分样品时,为了使各组分均有合适的k值并分离良好,也需采用梯度洗脱技术。
液相色谱仪流动相选择事项:
1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;
2、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;
3、使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相;A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。
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