液相色谱柱可以反冲吗?
很多用户在液相色谱柱上都会看到有“->”标志,这个标志是表示流动相的流动方向,但也有部分色谱柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字样,翻译为“决不能反冲”的意思,那么色谱柱是否可以反冲?能不能反冲争议很大,但在我们的实践中,使用色谱柱反冲技术修复色谱柱后,收到了柱效有所提高、柱效有所恢复的效果。那么在什么样的情况下,我们可以让色谱柱进行反冲技术呢?跟着谱析色谱小编一起去了解一下。
一、分析氨基酸的离子交换柱时,使用一段时间反柱效明显下降,用NaOH活化,仍达不到要求的,可使用NaOH反冲活化即可迅速恢复柱效,如图:
二、色谱柱使用一段时间后柱效明显下降,此时可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填满,然后用流动相反冲一下,可使柱效恢复正常,因为反冲可以改善柱头死空间。
三、因反冲可把沉积在过渡板上的细微颗粒冲走,有时也可用反冲技术使柱压降低。
反冲色谱柱的方法:
一、如果是已经保存好的色谱柱:1、反向接柱,先用 95水:5 乙腈 0.2 ml/min,冲 20倍柱体积;然后用四氢呋喃,0.2 ml/min,冲 20 倍柱体积;最后用 95 乙腈:5水,0.2 ml/min,冲 20 倍柱体积;如果正向接柱,使用65乙腈水保存色谱柱即可。
二、如果是刚走完样的色谱柱,那么请按照下列步骤进行:
1、卸掉保护柱;
2、正向接柱,常规方法冲洗色谱柱(先95水,后95乙腈或甲醇);
3.反向接柱,先用95水:5乙腈 0.2 ml/min,冲 20倍柱体积;然后用四氢呋喃,0.2 ml/min,冲 20倍柱体积;最后用95乙腈:5水,0.2ml/min,冲 20 倍柱体积;
4.正向接柱,用65乙腈水保存色谱柱即可。
需注意的是:1.20倍柱体积,2504.6mm大概 80ml 1504.6mm大概48ml2.反向接柱时不要链接检测器!